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Activité anti-inflammatoire et antioxydante d’un extrait de feuille d’Ampelopsis grossedentata
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Edité par CCSD -
International audience. Introduction et but de l’étude : L'inflammation chronique de bas grade est associée au développement ou accompagne diverses pathologies. Les études montrent que près de 50% des adultes dans les pays industrialisés présentent des marqueurs d'inflammation chronique élevés, tels que la protéine C-réactive (CRP). Cette forme d'inflammation est désormais reconnue comme un facteur clé dans le développement de maladies métaboliques telles que l'obésité, le diabète de type 2 et les maladies cardiovasculaires. Dans ce contexte, les plantes étant des sources privilégiées de nouveaux actifs, les recherches sur les plantes médicinales à potentiel anti-inflammatoires revêtent un fort intérêt. Ainsi, Ampelopsis grossedentata est une plante appelée aussi « thé de vigne », largement utilisée en médecine traditionnelle chinoise et qui est généralement utilisée en tisane pour le traitement des pathologies ORL, des vomissements et de la néphrite chronique. Les études phytochimiques ont montré sa richesse en flavonoïdes et notamment en dihydromyricétine (DHM) et en myricétine qui sont ses deux principaux flavonoïdes. Il a été montré que la DHM possède des activités biologiques variées telles qu’ anti-inflammatoire, anti-cancéreuse, anti-oxydante et anti-diabètique. L’objectif de cette étude est donc d’évaluer l’impact d’un extrait de feuilles d’A. grossedentata sur différentes voies impliquées dans le processus inflammatoire au niveau de cellules immunitaires humaines dans le but de lutter contre le développement de cette inflammation de bas grade.Matériels et méthodes : Un extrait (EtOH/eau 50/50%) d’A. grossedentata a été évalué sur : 1/ la production de ROS par les leucocytes humains (N° EFS AURA 22-106) après stimulation des cellules par PMA (détection de fluorescence, DHR123, Tecan®). 2/ sur la production de cytokines pro-inflammatoire par des PBMCs humains (n=3) après stimulation par PHA et utilisation de la technologie Luminex™. 3/ par suivi de l’expression (qRtPCR) de COX2, NLRP3, IL-1β, Caspase-1 (ie inflammasome) et de la production de PGE2 (ELISA) par les leucocytes humains stimulés au LPS. 4/ sur l’activation des monocytes (lignée THP-1) en macrophages et sur la polarisation en macrophages pro-inflammatoires de type M1 via la mesure des marqueurs spécifiques par PCR quantitative (TNF-α, IL-6, IL-8, IL-1β, CXCL10) et des marqueurs membranaires CD14 et CD80 par cytométrie en flux.Résultats et Analyses statistiques : L’extrait d’A grossedentata a induit une diminution significative de la production de ROS pour toutes les concentrations testées (-33±4 %, -41,0±3,3%, -49,0±3,3% et -51,.0±4,4% à 10, 25, 50, 100 µg/mL respectivement, p<0,05 vs contrôle). De plus, cet extrait a entrainé une diminution significative de la production de cytokines pro-inflammatoires telles que l'IFNy, de l'IL-17a, de l'IL-12 et de l'IL-2 (-99%±0,66, -94%±3, -61± 20% et -80±14 % respectivement, par rapport au contrôle stimulé par la PHA, p<0,05). Concernant l'IL-1β et l'IL23, une diminution non significative est observée (-24,3±16,5% et -38,0±5,2% respectivement). En parallèle, l’extrait a entrainé une diminution de l’expression de NLRP3 (RQ=0,6±0,2, p<0,05), IL-1 (RQ=0,6±0.2, p<0,05), Caspase-1 (RQ=0,5±0,1, p<0,05) et COX2 (RQ=0,5±0,3, p<0,01), mais aucun effet sur la production de PGE2. Concernant la polarisation macrophagique, une diminution significative de l'expression génétique du TNF-α (RQ=0,6±0,1, p<0,01) et de l'IL-6 (RQ=0,2±0,3, p<0,01) dans les macrophages de type M1, ainsi qu'une légère diminution de l'IL-8 (RQ=0,8±0,4, p=0,77) et de l'IL-1β (RQ=0,8±0,3, p=0,55) a été observée. Enfin, l’extrait est responsable d’une diminution significative de la proportion de macrophages M1 (70,29%±2,71 vs 90,72%±0,47) et d’une augmentation la proportion de M0 (9,27±0,45 vs 29,70±2,71).Conclusion : Les résultats de cette étude montrent pour l’extrait d’A. grossedentata des effets anti-oxydant et anti-inflammatoire notamment au niveau de la production de cytokines pro-inflammatoires, de l’expression des gènes de l’inflammasome ainsi que sur la polarisation des monocytes en macrophages M1. Ces résultats préliminaires suggèrent que cet extrait pourrait être intéressant à utiliser en situation d'inflammation pour la prévention de l’apparition ou l’accompagnement des maladies chroniques liées à l'inflammation.
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