0 avis
Genetic and Molecular analysis of ovum mutant, a conditional lethal mutation carried by DDK mouse strain : candidate genes screen.. Analyse genetique et moleculaire d'ovum mutant, une mutation letale conditionnelle a effet parental portee par la lignee de souris ddk : recherche de genes candidats
Archive ouverte
Edité par CCSD -
The ddk inbred line carries a letal mutation, ovum mutant. Crosses between ddk females and males from other lines show reduced fecundity, while reciprocals are fertile. This reduction results from the death, in ddk syndrome, of f1 embryos at the morula-blastocyst stage. It is due to incompatibility between a ddk maternal product and a non-ddk paternal component. We have shown that the phenotype of heterozygous females is genetically modified by modifier genes, and that allele transmission depends on the non-ddk sperm. Moreover, male phenotype is affected by the ddk allele in heterozygous males. To identify the gene(s) responsible for ddk syndrome, the laboratory has undertaken positional cloning of genes present in the om (ovum mutant) locus. Located on chromosome 11, it contains both parental factors and represents a physical region of 1600 kb cloned in 31 yacs and bacs. 107 markers, including 24 genes, were identified by various techniques, including exon trapping, which I performed on 12 bins. We chose to select candidates for the maternal and/or paternal factor by their expression profile in ddk oocytes and non-ddk testes. Ten are candidates for the maternal factor and 30 for the paternal factor. Among them, I studied notchless expressed in oocytes and presenting a specific mutation that modifies the ddk protein sequence. I was interested in characterizing the function of the notchless gene in mice, as it is a regulatory protein of the notch signaling pathway in Drosophila and Xenopus. By in situ hybridization, I was able to define its specific expression profile in branchial arches, limb buds and endothelial cell precursors in post-implantation development. To define its function, I initiated its inactivation by homologous recombination in es cells. . La lignee consanguine ddk est porteuse d'une mutation letale, ovum mutant. Les croisements entre des femelles ddk et des males d'autres lignees presentent une fecondite reduite, alors que les reciproques sont fertiles. Cette reduction resulte de la mort, syndrome ddk, des embryons f1 au stade morula-blastocyste. Elle est due a une incompatibilite entre un produit maternel ddk et une composante paternelle non-ddk. Nous avons montre que le phenotype des femelles heterozygotes est genetiquement modifie par des genes modificateurs, et que la transmission des alleles depend du spermatozoide non-ddk. De plus, le phenotype du male est affecte par l'allele ddk chez les males heterozygotes. Pour identifier le (ou les) gene(s) responsable(s) du syndrome ddk, le laboratoire a entrepris le clonage positionnel des genes presents dans le locus om (ovum mutant). Localise sur le chromosome 11, il contient les deux facteurs parentaux et represente une region physique de 1600 kb clonee dans 31 yacs et bacs. 107 marqueurs, dont 24 genes, ont ete identifies par differentes techniques dont le piegeage d'exons que j'ai realise sur 12 bacs. Nous avons choisi de selectionner les candidats au facteur maternel et/ou paternel par leur profil d'expression dans les ovocytes ddk et les testicules non-ddk. Dix sont candidats au facteur maternel et 30 au paternel. Parmi eux, j'ai etudie notchless exprime dans les ovocytes et presentant une mutation specifique qui modifie la sequence proteique ddk. Je me suis interessee a caracteriser la fonction du gene notchless chez la souris car c'est une proteine regulatrice de la voie de signalisation notch chez la drosophile et le xenope. Par hybridation in situ, j'ai pu definir son profil d'expression specifique dans les arcs branchiaux, les bourgeons de membres et les precurseurs des cellules endotheliales dans le developpement postimplantatoire. Pour definir sa fonction, j'ai initie son inactivation par recombinaison homologue dans les cellules es.
Consulter en ligne
Suggestions
Du même auteur
