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Composition de vésicules extracellulaires du liquide folliculaire ovarien chez la vache
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Edité par CCSD -
International audience. Les vésicules extracellulaires (VEs) sont libérées des cellules par différents mécanismes et sont présentes dans la plupart des fluides corporels. Les microvésicules (MVs) sont formées par un bourgeonnement de la membrane plasmique et possèdent des tailles entre 100-1000 nm tandis que les exosomes, de 30 à 150 nm de diamètre, proviennent de la membrane endosomale. Celle-ci forme des corps multivésiculaires, qui libèrent des exosomes après le fusionnement avec la membrane plasmique. Au sein d’un follicule ovarien antral, le fluide folliculaire (FF) contient différentes VEs qui sont produites par les cellules folliculaires. Dans les échanges entre l’ovocyte et les cellules somatiques folliculaires, les exosomes ont un rôle de cargo moléculaire contenant des microARN, protéines et lipides, qui peuvent être absorbés par les cellules cibles. L’objectif a été de comparer le contenu protéique et lipidique de MVs et d’exosomes extraits du FF bovin. Nous avons utilisé le phénotypage moléculaire par spectrométrie de masse MALDI-TOF (RapifleX Tissuetyper, Bruker Daltonics) pour établir les empreintes protéiques/peptidiques et lipidiques de MVs et d’exosomes issus de follicules de taille 3-8 mm. Ces derniers sont couramment utilisés comme une source d’ovocytes dans les biotechnologies de reproduction chez la vache. Les populations de MVs et d’exosomes ont été constituées à partir de 6 pools de FF par centrifugations différentielles allant de 2,000g à 100,000g. La taille moyenne des VEs déterminée par microscopie électronique était de 170±72 nm pour les MVs, et de 60±22 nm pour les exosomes. Les profils lipidiques acquis en mode positive ou négatif, ainsi que les empreintes protéo-peptidiques se sont révélés significativement différents entre MVs et exosomes selon l’abondance de plusieurs lipidoformes et protéoformes (p<0.05). L’annotation de ces biomolécules détectés dans les MVs et exosomes aide à comprendre le rôle de ces deux types de VEs dans les échanges moléculaires, la dégradation des protéines et le métabolisme des lipides au sein du follicule ovarien. Financement : Région Centre (achat du MALDI-TOF), INRAE département PHASE, Fond Scientifique de la Russie (RNF, projet 19-16-00115).
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